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混合型生物洗油菌发酵上清液的表面张力值测定（三）
来源：东北石油大学三亚海洋油气研究院 黑龙江省科学院微生物研究所 浏览 1166 次 发布时间:2025-01-03
实施例2
表面张力测试：采用白金板测定菌株发酵上清液的表面张力。
将解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌剂（解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1数量比混合）分别接种于LB液体培养基中，在28~30℃条件下振荡培养发酵，直至发酵液中菌落浓度达到108～109
cfu/mL。
分别取上述各组30 mL发酵菌液，10000×g室温离心10 min，取各组发酵上清液，利用91免费短视频污污污测定各组发酵液的表面张力，测定3次，取平均值，测试结果如表1所示。
表面张力是洗油剂对原油洗脱能力的重要指标，数值越低、洗脱能力越强。测试结果显示解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8发酵上清液均能降低表面张力，混合菌剂发酵上清液的表面张力值更低。
实施例3
界面张力测试：在45℃下，采用TX500C界面张力仪测定菌株发酵上清液与原油间的界面张力。
将解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌剂（解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1数量比混合）分别接种于LB液体培养基中，在28~30℃条件下振荡培养发酵，直至发酵液中菌落浓度达到108～109cfu/mL。
分别取上述各组30 mL发酵菌液，10000×g室温离心10 min，取各组发酵上清液，在45℃下，用TX500C界面张力仪进行测定，另取同体积的LB液体培养基作为空白组。当连续3次读数之差在10-3m N/m之内时，即可认为测定的体系已经达到平衡状态，记录最终的界面张力，测试结果如表2所示。
从表2实验结果中可以看出与空白相比解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8的界面活性好，油水界面低至1.92 mN/m和1.90mN/m，为低界面张力水平。混合菌剂的界面活性更为突出，低至0.68mN/m。
实施例4
洗油实验：
将原油与石英砂按照质量比为1∶5搅拌均匀制备油砂，放入60℃烘箱中老化24 h，取出密封备用。
将解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌剂（2组，解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens
）ZZ-11和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1和3:2数量比混合）分别接种于LB液体培养基中，在28~30℃条件下振荡培养发酵，直至发酵液中菌落浓度达到108～109cfu/mL。
分别将上述各组30 mL发酵液倒入不同的离心管中，另取同体积30 mLLB液体培养基作为空白组；然后各离心管分别放入上述经过老化的15g的油砂（初始油砂含油量为2.5g），密封，均匀震荡5次后，放入60℃烘箱静置，24 h后取出。倾倒尽上层液体后，用20~25℃蒸馏水反复冲洗至水相无色，并收集合并冲洗液。
再将油砂烘干进行称量（离心管+油砂），质量为m1，离心管的质量为m0。
洗油效率η通过如下公式进行计算：
η=(15-(m1-m0))/2.5
各组洗油效率测试结果如表3所示，解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8发酵液均具有优秀的洗油效率，本发明混合菌剂的洗油效率更为优异，分别达到84.39%和93.32。
综合实施例1~4的测试结果说明解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8均可作为生物洗油菌；本发明混合菌剂能将油从油砂表面分离开来，洗油后油砂洁净、松散，有防止原油再粘附的作用，具有十分优异的洗油效果。